ردیابی مایکوپلاسما گالی سپتیکوم در طیور به روش PCR

عفونت مایکوپلاسمایی:

مایکوپلاسماگالی سپتیکوم به عنوان یکی از مهم ترین عوامل تهدیدکننده سلامت گله های طیور بشمار رفته و در حدود یک سوم جمعیت طیور تخمگذار عموم کشورها با این عفونت درگیر بوده 75% این مرغان در سنین متفاوت و 25 درصد همسن بوده اند . تحقیقات نشان داده طیور، علائم بیماری را تا برخورد به شرایط خاص نظیر استرس بروز نمی دهد . بروز بیماری متعاقب درگیری با عفونت ، تابع شرایط محیطی می باشد و عامل بیماری در مقابل مواد شیمیایی مختلف نظیر ضد عفونی کننده ها و آنتی بیوتیک های وسیع الطیف حساسیت زیادی نشان می دهد . عوامل مستعد کننده شامل کمبود مواد غذایی ، بدی شرایط تغذیه ، نحوه مدیریت فارم ها و نیز میزان آمونیاک و گرد و غبار می باشند. سایر عوامل بیماری زا شامل ویروس نیوکاسل و عفونت های تنفسی (برونشیت ) سویه های مورد استفاده در واکسن و یا فرم بیماری زای اشرشیا کلی و هموفیلوس گالینارم نیز مطرح می باشد
سرعت انتشار این بیماری در داخل گله بسیار زیاد است . زمان انتشار بیماری درتمامی گله در حدود یک یا دو هفته بعد از اولین آلودگی می باشد . نحوه انتشار از طریق تماس مستقیم و نیز از طریق هوا ، گرد و غبار ، قطرات آب و ظرف و لوازم آلوده است. شدت و میزان درگیری گله با بیماری متغییر بوده ، در فصول سرد ، دوره نهفتگی بیماری طولانی تر و حدت بیشتری دارد ، به خصوص در طیور جوان حدت بیماری از طیور مسن بیشتر است . طیور بهبود یافته در واقع به عنوان حامل بیماری مطرح می باشند . علائم این بیماری به تدریج در گله نمود پیدا می کند . علائم تنفسی معمولاً تا هفته ها باقی می ماند .اولین علامت ریزش ترشحات کف آلوده و تورم چشم ها می باشد . طیور مبتلا برخی اوقات علایمی نظیر سرفه خشک و خس خس و رال تنفسی را نشان می دهند . ضعف وضعیت جسمانی و افت وزنی معمولاً در این بیماری مشهود است.
طیور تخم گذار کاهش مصرف غذایی را نشان داده و به تولید خود در سطح پایینی ادامه می دهند . اولین ضایعات در بوقلمون در کیسه های هوایی و ریه ها نمایان می شوند . در بعضی موارد تورم یک یا هر دو سینوس پیش چشمی رخ می دهد. اغلب کیسه های هوایی ضخیم و تورم را نشان می دهند ( به خصوص اگر این مسئله با واکسیناسیون های برونشیت و نیوکاسل توام باشد ) حتی در برخی موارد کیسه های هوایی دارای ترشحات پنیری ولزج هستند .

پیشگیری :

1-به عنوان اولین قدم ، امروزه قرنطینه انفرادی در مرغداری ها اعمال می شود.

2- همه فعالیت ها را باید متوقف نمود، افرادی که به مرغداری رفت و آمد دارند (به خصوص آنهایی که با گله تماس دارند)از مهمترین عوامل انتقال محسوب می شوند .

3-هر ساله باید کلیه فعالیت ها را ثبت و در گزارشات قید نمود . این مسئله کمک بسزایی برای افرادی خواهد بود که برای ارزیابی گله و درمان یا جلوگیری از پیشرفت بیماری فعالیت می کنند .

4- از بازدیدهای غیرضروری ، مخصوصاً از سایر فارم ها اجتناب شود و برای بازدیدکنندگان لباس و روپوش های مجزا و مخصوص فراهم نمایید .

تشخیص مایکوپلاسما: هیچ یک از نشانه های بالینی یا جراحات کالبد گشایی یا بافت شناسی برای عفونت MG در طیوراختصاصی نیستند. قطعی ترین روش برای تأیید عفونت جدا سازی باکتری می باشد اما برای جداسازی نیاز به محیط غنی کننده فاکتور NADاست برای کشت از جنین های مرده داخل پوسته،کیسه زرده،کلواک و کیسه هوا یی استفاده میشود.اگر درچند هفته اول تلف شده باشد از نا ی و درمسن ترها در هرسنی به خصوص شروع تخم گذاری از شکاف سقف دهان ، مری ،کیسه های هوایی، نای و کلواک نمونه برداری شود.در مورد تخم مرغ جنین دار از سطح داخلی غشاء ویتلین، ناحیه دهانی حلقی و کیسه های هوایی سواب گرفت. آزمایش های رایج شامل SPA ، HI، PCR, ELISA می باشد که حساسیت بالایی دارند.

تست های تشخیصی :

اعتقاد عمومی بر این است که بروز عفونت مایکوپلاسما گالی سپتیکوم یک ضایعه بزرگ برای مرغدار محسوب می شود . به علاوه افت تولید و تلفات ، مرغدار را وادار به استفاده از دارو و سایر تمهیدات نظیر پاکسازی محیط و نگهداری مضاعف می نماید. سالن ها حداقل برای مدت 30 تا 90 روز باید خالی نگه داشته شوند. کاهش تولید ، کاهش فروش را در پی داشته و وضعیت را به مراحل بدتر سوق میدهد . اگر گله ای آلودگی به این نوع بیماری را نشان دهد معمولاً سود خوبی نخواهد داشت. از سویی دیگر در شرایط تجربی طول دوره کمون بیماری ، فاصله زمان آلودگی و بروز عفونت بین 6-21 روز می باشد . این در حالیست که در شرایط طبیعی در فارم ها به دلیل عدم کنترل جمیع شرایط امکان تشخیص دقیق دوره نهفتگی بیماری (میزان و طول مدت تهاجم عامل بیماری ) وجود ندارد.
ظهور علایم با شروع تولید مقارن بوده (بین هفته 26-38) و احتمالاً نشان دهنده دوره نهفتگی طولانی این بیماری می باشد.

کالبد گشایی : در میان روش های تشخیصی ، در روش کالبد گشایی ممکن است جراحات کالبد گشایی موجود در دستگاه تنفسی چنان خفیف باشد که به خوبی مورد توجه قرار نگیرد هم چنین هیچ علامت کاملا اختصاصی برای در کالبد گشایی طیوربرای مایکوپلاسما وجود ندارد

سرولوژی : از آنجایی که آزمایشات سرولوژی به علت پدیده تداخل متقابل با گونه های دیگر مایکوپلاسما و هم چنین حضور فاکتور های متغیر در سرم حساسیت و اختصاصیت کافی در تشخیص سویه های مایکوپلاسما را ندارند، باعث بروز جواب های مثبت کاذب می شوند

کشت: جداسازی و کشت مایکوپلاسما روشی قطعی بوده اما کشت پر هزینه و زمان بر بوده ، هم چنین مایکو پلاسما سخت رشد می باشد .

واکنش زنجیره ای پلی مراز (PCR) :واکنش زنجیره‌ای پلی­مراز روش جایگزین سریع و اختصاصی برای کشت می‌باشد. در دهه 1990 روش­های مولکولی برای شناسائی مایکوپلاسمای پرندگان توصیف شد. اساس تمام آنها مبتنی بر تکثیر یا شناسائی یک قطعه خاص از ژنوم می‌باشد.یکی از روش های سریع برای شناسایی مایکوپلاسما، روش­های مبتنی بر شناسایی DNA است که به­طور مستقیم از بافت یا جدایه‌های دیگر استفاده میشود. نتایج PCR ظرف یک تا دو روز مشخص می‌شود، همچنین PCR قادر است نتایج دقیقی در حضور عفونت‌های مخلوط با چندین مایکوپلاسما، آلودگی با عفونت‌های باکتریایی ثانویه، مهارکننده‌های رشد مایکوپلاسما مثل آنتی بادی، آنتی بیوتیک، یا سایر عوامل میزبانی ارائه دهد..

تورم سینوس‌ها در بوقلمون‌ها بسیار مشهود می ‌باشد به طوری که پرنده قادر به دیدن آب و غذا نمی‌باشد.